我国柑橘生产规模较大，经济价值高，但近年来柑橘病害日益加重。世界上已报道的柑橘病毒和类病毒超过40种，严重影响柑橘产业的持续健康发展，而微芽嫁接（试管内茎尖嫁接）技术可脱除柑橘中的多种病害（刘科宏等，2016）。Murashinge等（1972）创立了微芽嫁接技术，即利用茎尖组织培养技术结合嫁接技术获得无菌苗。茎尖组织培养是微芽嫁接的前期工作，但目前柑橘成年态茎段组织培养技术尚未成熟，组培过程中茎段污染率高且受季节影响，重庆柑橘苗芽体增殖分化受激素影响，制约了相关生物技术在柑橘生产上的应用（邓才生等，2009；乔芬等，2011）。因此，优化柑橘茎段离体培养条件并开展微芽嫁接试验，对提高柑橘茎尖组织培养效率及发展柑橘产业具有重要意义。【前人研究进展】邓才生等（2009）研究认为，使用1‰ HgCl2对柑橘外植体消毒可获得理想的消毒效果；李丽（2014）研究发现，使用5%和10%NaClO对柑橘外植体进行消毒可获得较理想的消毒效果。在促进腋芽萌发方面，陈泽雄等（2007）研究发现，柑橘茎段在添加1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤（6-BA）+0.2 mg/L萘乙酸（NAA）的培养基中腋芽萌发率更高；周海霞（2010）研究认为，培养基中添加1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L吲哚丁酸（IBA）+0.5 mg/L GA3更有利于红江橙腋芽萌发；李丽（2014）研究发现，1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L吲哚-3-乙酸（IAA）+1.0 mg/L赤霉素（GA3）更有利于柑橘腋芽萌发。在柑橘嫁接萌芽方面，罗君琴等（2011）研究发现，柑橘的嫁接萌发率为0～20%；隆雨薇（2015）研究认为，柑橘试管内嫁接萌发率较低，仅4.5%，不同品种间存在差异，嫁接萌发率亟待提高。【本研究切入点】目前，针对筛选纽荷尔脐橙和温州蜜柑茎段组织离体培养最佳消毒方法、采集时期及培养基中激素配比培育优质柑橘脱毒苗的研究报道较少，且柑橘微芽嫁接后嫁接苗萌发率较低，关于温州蜜柑和纽荷尔脐橙微芽嫁接的研究也鲜见报道。【拟解决的关键问题】以温州蜜柑和纽荷尔脐橙的成年态茎段（半木质化新梢）为外植体，筛选适合其消毒的最佳方法、最佳采集时期及培养基中的激素配比，开展嫁接砧木种子消毒和微芽嫁接试验，为培育优质柑橘无菌苗木提供参考依据。
　　成年态柑橘茎段携带有大量微生物，进行组织培养后易产生污染，找寻适当的消毒方法降低外植体污染率是进行后续组培研究的前提。多数文献指出，使用最佳消毒方法对柑橘成年态外植体进行消毒，其污染率仍达10%～30%（徐定华等，2007；Shokrollah et al，2009；胡选萍和陈志远，2014；Hilf and Lewis，2016）。本研究中，两个柑橘品种外植体均进行两次消毒，第1次消毒时，部分微生物未被彻底杀死，放置48 h后，多数菌体萌发，但在第2次消毒中被杀死，有效提高了消毒效果；纽荷尔脐橙茎段使用10%NaClO溶液消毒，污染率为23.52%，与王子成等（2005）对脐橙茎段进行灭菌的污染率（24.88%）相近。罗君琴等（2007）研究认为，温州蜜柑外植体使用HgCl2消毒时间过短则灭菌效果不佳，污染率较高，影响萌芽；灭菌时间超过6 min，消毒液的毒害作用会导致萌芽率下降，以灭菌6 min的效果较佳，萌芽率为57.5%。本研究结果与其相似，经HgCl2消毒6 min的温州蜜柑外植体萌芽率为64.62%。http://www.yuguomm.com